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同位素标记相对和绝对定量评价非创伤性股骨头坏死患者的血清蛋白组学分析

更新时间:作者:小小条

摘要:

文题释义:

iTRAQ技术:是由AB SCIEX公司研发的一种基于体外等重同位素标记的相对与绝对定量技术。该技术利用4种或8种同位素试剂标记多肽末端氨基或赖氨酸侧链氨基基团,经高分辨质谱仪串联分析,可同时比较多达8种样品之间的蛋白质表达量,是近年来定量蛋白质组学常用的高通量筛选技术。

同位素标记相对和绝对定量评价非创伤性股骨头坏死患者的血清蛋白组学分析

背景:非创伤性股骨头坏死是一类以髋关节疼痛、功能障碍进行性加重为主要症状的疾病,严重危害人体健康。它的发病机制、早期诊断和治疗仍是临床骨科医生所面临的重大挑战。

目的:采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术,用蛋白质组学筛选可能与非创伤性股骨头坏死相关的关键蛋白。通过分析这些蛋白的表达特性及潜在的生物学功能,为进一步研究非创伤性股骨头坏死病因及分子机制奠定基础。

方法:提取非创伤性股骨头坏死患者和健康人血清蛋白,应用iTRAQ技术标记蛋白,联合液相色谱和串联质谱分离和分析肽段。采用Proteome Discoverer 2.1软件对两组人群蛋白进行鉴定和定量分析,获得差异蛋白,再对这些表达差异蛋白进行GO注释、KEGG通路注释和功能富集聚类分析。

结果与结论:①质谱鉴定共得到1 006个蛋白,通过分析得到137个差异表达蛋白,其中54个蛋白表达上调,83个蛋白表达下调;②与非创伤性股骨头坏死发生相关的表达差异显著的蛋白质包括载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白A2(ApoA2)、载脂蛋白E(ApoE)、补体C4和C7等;③KEGG信号通路富集分析结果显示,关键靶点的主要信号通路为p53信号通路、转录生长因子 β信号通路、扩张型心肌病信号通路;④该结果提示,载脂蛋白与非创伤性股骨头坏死发生密切相关,并发现了与非创伤性股骨头坏死相关的活跃信号通路,为非创伤性股骨头坏死发生及分子机制奠定一定的实验基础。

https://orcid.org/0000-0002-6743-399X (张恩景);https://orcid.org/0000-0002-9919-8111 (李章华)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程

关键词: 非创伤性股骨头坏死, 同位素标记相对和绝对定量蛋白质组学技术, 质谱, 蛋白质差异表达

引用本文:张恩景, 蔡进奎, 许海甲, 李天航, 李章华. 同位素标记相对和绝对定量评价非创伤性股骨头坏死患者的血清蛋白组学分析[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(29): 4664-4669.

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同位素标记相对和绝对定量评价非创伤性股骨头坏死患者的血清蛋白组学分析

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